ELISA（酶联免疫吸附测定）试剂盒的检测原理基于抗原-抗体特异性结合和酶催化反应的特性。以下是ELISA试剂盒检测原理的详细解释： 1.固相化抗原或抗体：首先，将抗原或抗体固定在固相载体上，通常是聚苯乙烯微孔板。这一步骤使得抗原或抗体可以稳定地吸附在板上，便于后续的检测步骤。
2.样品加入：待测样品（如血清、尿液、组织提取物等）被加入微孔板中。如果样品中含有目标抗原或抗体，它们将与固相载体上的相应抗体或抗原发生特异性结合。
3.洗涤：未结合的样品成分被洗涤去除，以减少非特异性反应和背景干扰。
4.加入酶标记的二抗：如果检测的是抗体，则加入酶标记的二抗（通常是与样品中抗体特异性结合的抗体）。如果检测的是抗原，则加入酶标记的一抗（通常是与样品中抗原特异性结合的抗体）。这些酶标记的二抗或一抗能够与固相载体上的抗原或抗体结合。
5.再次洗涤：未结合的酶标记抗体或一抗被洗涤去除。
6.底物加入：加入底物溶液，底物在酶的催化下发生化学反应，产生颜色变化。
7.显色反应：酶催化底物产生颜色反应，颜色的深浅与样品中目标抗原或抗体的浓度成正比。
8.终止反应：加入终止液停止酶促反应，使颜色稳定。
9.读数：使用酶标仪在特定波长（通常是450nm）下测量微孔板中每个孔的颜色强度（吸光度值）。吸光度值与样品中目标抗原或抗体的浓度相关。
通过比较样品孔的吸光度值与已知浓度的标准品孔的吸光度值，可以绘制标准曲线，从而定量分析样品中目标抗原或抗体的含量。
ELISA试剂盒因其高灵敏度、特异性和易于操作等优点，被广泛应用于医学诊断、药物研发、食品安全检测、环境监测和基础研究等领域。
