膜蛋白提取试剂盒

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：qiaoxing2013

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哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。

产品简介：

哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。传统制备膜蛋白样品的方法是使用去污剂和表面活性剂增溶。去污剂处理会使膜蛋白丧失其天然结构，因而妨碍了膜蛋白的功能研究。

膜蛋白提取试剂盒是一种基于化学而非去污剂方法的高产膜蛋白提取试剂盒。本试剂盒提供全套试剂，适用于从细胞和动物组织提取膜蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。提取的膜蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

产品组成：

使用方法：

A． 细胞蛋白提取

1.       取5-10×10⁶个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2.       用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3.       每20ul细胞压积中加入200μl冷的试剂 A，2ul蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。

4.       再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。

5.       快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，12000转4℃离心10分钟取沉淀溶于试剂B中。

6.       试剂B12000转4℃离心10分钟，取沉淀溶于试剂C中。。

7.       即可得到膜蛋白。

B． 组织蛋白提取

1.       取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。

2.       在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。

3.       按照细胞蛋白的提取方法的第3步骤往下操作即可。

上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

注意事项：

1.     实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。

2.     整个过程须保持样品处于低温状态。

储存条件：

-20℃保存。

有效期：

一年。