超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,并达到30倍的浓缩。
超滤离心管的使用方法:
1、将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。
2、向超滤管内管中加入不超过500μL的样本,并盖上盖子。
3、将盖好盖子的超滤管放入离心转子中,让盖子的连接带朝着转子的中间,用一个类似的超滤管平衡。
4、离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。
5、为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间,用一个类似的超滤管进行平衡,超滤液可以保存在收集管中。
注意,当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要准确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。